Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys: dekoodaus, menetelmät

Liittyvien tieteiden, kuten genetiikan, molekyylibiologian, kemian, kehityksen sekä teknisen kehityksen kasvun myötä moderni lääketiede ylpeilee innovatiivisilla menetelmillä monenlaisten ihmisten sairauksien diagnosoimiseksi. Niille on ominaista korkea tulosten tarkkuus ja suorituskyvyn turvallisuus. Yksi näistä tavoista tunnistaa terveysongelmat on entsyymisidottu immunosorbenttimääritys. Se on saanut laajaa suosiota viimeisen vuosikymmenen aikana ja on saanut maineen erittäin tehokkaana, luotettavana ja potilaille turvallisena menetelmänä tautien havaitsemiseksi jo ennen ulkoisten oireiden puhkeamista. Selvitämme helposti, mikä tämäntyyppinen diagnoosi on, mikä on sen toiminnan periaate, huomaamme edut, suunnaamme tällaisen analyysin kustannuksiin.

Kehon reaktio patogeeniseen kasvistoon

Jotta ymmärretään, miten entsyymisidonnaisen immunosorbenttimäärityksen ansiosta laboratorioteknikot diagnosoivat erilaisia ​​sairauksia, on tarpeen ymmärtää fysiologinen prosessi, joka tapahtuu kehossa infektioiden aiheuttaman infektion aikana. Kun patogeeninen mikro-organismi saapuu verenkiertoon, ihmisen immuunijärjestelmässä tapahtuu suojaava reaktio tiettyjen aineiden - vasta-aineiden - vapautumisen muodossa. Ne sitoutuvat soluun ja analysoivat onko se osa vartaloa vai tunkeutunut ulkopuolelta. Jos immuunijärjestelmä toteaa, että solu on vieraita, vasta-aineiden määrä alkaa kasvaa patogeenisen mikro-organismin torjumiseksi.

Vasta-aineita on monissa muodoissa ja niillä on omat piirteensä. Jotkut aineet ilmestyvät suoraan tartuntakaudella, toiset pysyvät koko elinajan ihmiskehossa, ja heidän ansiostaan ​​ne kehittävät vakaan immuniteetin tiettyyn sairauteen. Proteiinirakenteet jaetaan seuraaviin tyyppeihin: A, D, E, M, G. Lääketieteessä vasta-aineita kutsutaan immunoglobulineiksi. Siksi on tapana nimetä näiden aineiden indikaattorit latinalaisin kirjaimin Ig.

Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys (ELISA) perustuu lääketieteellisestä tiedosta saatuihin tietoihin. Käyttämällä laboratoriossa erityisiä antigeenejä on mahdollista määrittää tiettyjen vasta-aineiden esiintyminen tai puuttuminen biologisessa materiaalissa. Tällaisen analyysin tulosten perusteella lääkäri voi tehdä diagnoosin ja määrittää patologian esiintymisen lisäksi myös sen alkuperän rajoittamisen potilaan vaaratason tunnistamiseksi. Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys tutkii useammin kuin muut ryhmien M ja G vasta-aineiden läsnäolon.

Mikä on IFA??

Itse asiassa entsyymisidottu immunosorboiva määritys ei ole innovaatio nyky-yhteiskunnassa. Se keksittiin takaisin 80-luvulla. Mutta tällaisten tutkimusten suorittamiseen vaadittiin tilaa vieviä kalliita laitteita. Siksi tätä menetelmää käytettiin vain erityisesti varustetuissa tieteellisissä laboratorioissa: sitä käytettiin solujen ja kudosten tyypittämiseen. Mutta sitten hän ei saanut laajaa jakelua diagnostisessa lääketieteessä, sen käyttö oli teknisesti vaikeaa ja erittäin kallista. ELISA parani vain tekniikan kehityksen ja biopolymeerimateriaalien keksimisen myötä. Sen jälkeen menetelmää alettiin popularisoida ja saada luottamusta lääketieteellisiin piireihin.

Kuten edellä mainittiin, tähän menetelmään sisältyy tiettyjen immunoglobuliiniryhmien havaitseminen biomateriaalissa - veressä, amnionivedessä, lasimaisessa tai aivo-selkäydinnesteessä -..

On tutkimuksia ilman antigeenin levittämistä pintaan ja entsyymisidottua immunosorbenttimääritystä, johon liittyy reaktio erityisissä kaivoissa. Jälkimmäisellä menetelmällä on suuri herkkyys ja luotettavuus, minkä vuoksi lääketieteellisissä laboratorioissa suoritetaan tällä tavalla analyysi ihmisen sairauksien havaitsemiseksi.

Entsyymiin kytketty immunosorbentti-määritys

Väitetystä sairaudesta riippuen entsyymiliittyneestä immunosorbenttimäärityssarjasta käytetään tarvittavaa antigeeniä, joka kemiallisen reaktion aikana tartunnan läsnä ollessa sitoutuu patogeeniseen kasvistoon. Tätä prosessia kutsutaan immuunivasteeksi..

Sitten, jotta voidaan visuaalisesti määrittää tutkimuksen tulos, suorita ELISA: n entsymaattinen vaihe. Tähän sisältyy materiaalin värjäys erityisillä reagensseilla. Tässä tutkimuksessa käytetään entsyymejä, kuten alkalista fosfataasia, peroksidaasia ja avidiinia. Kemiallisten reaktioiden aikana saadun värin mukaan entsyymi-immunomäärityksen tulos määritetään.

Mikä on kolorimetria??

Diagnoosin entsymaattisen vaiheen analyysi suoritetaan menetelmällä, jota kutsutaan "kolorimetriseksi". Tosiasia on, että materiaalin värin lisäksi ei anneta tietoa infektiosta, vaan myös kemiallisista reaktioista johtuvasta väritiheydestä. Juuri tämä indikaattori määrää patogeenisen mikro-organismin pitoisuuden. Jos manuaalista diagnostiikkamenetelmää käytetään vanhalla tavalla, näiden indikaattorien määrittämiseksi rakennetaan erityinen kalibrointikaavio.

Nykyaikaisissa laboratorioissa manuaalista menetelmää käytetään nykyään harvoin. ELISA-analyysiin käytetään erityistä laitetta - kolorimetriä, jossa vain tutkimusparametrit asetetaan manuaalisesti ja sitten kaikki työ, mukaan lukien piirtäminen, suoritetaan automaattisesti.

ELISA-menetelmät

Entsyymimmuunimäärityksessä on suoria ja epäsuoria menetelmiä. Ensimmäinen näkymä vie vähemmän aikaa, koska siinä on vain 3 suoritusvaihetta. Ensin lisätään spesifisiä vasta-aineita koemateriaalin antigeeneihin, jotka on sijoitettu erityisiin kaivoihin. Sitten niiden ylimääräinen määrä poistetaan ja analyysin entsymaattinen vaihe suoritetaan, jolloin saadaan tulos.

Epäsuoraa menetelmää käytetään paljon useammin, koska sen herkkyys on suurempi kuin suoraa diagnoosimenetelmää. Sitä suoritettaessa käytetään kaksoistutkimusta. Nimittäin, antigeeni liitetään ensin leimaamattomaan vasta-aineeseen ja sitten leimattuun vasta-aineeseen. Tämä prosessi vie enemmän aikaa, mutta tulos on tarkin..

Reagenssisarjat

Eri valmistajat tuottavat entsyymisidottuja immunosorbenttimäärityssarjoja monenlaisissa kokoonpanoissa. Venäjällä tunnustettu yritys on lääketieteen ja biologian liitto. Tämä valmistaja tuottaa reagenssipakkauksia ELISA-tutkimuksiin melkein kaikista leveysasteillamme yleisistä infektioista, jotka voidaan analysoida tällä tavalla. Itse reagenssien lisäksi sarjoihin sisältyy lisämateriaaleja, mikä varmistaa turvallisuuden, mukavuuden ja nopeuden analyysissä. Lisäksi kemialliset aineet on maalattu eri väreillä, mikä vähentää virheen todennäköisyyttä reagenssin laboratorioassistentin valinnassa.

Kemiallis-biologiset sarjat eroavat toisistaan ​​suhteellisen saatavuuden suhteen, mikä vaikuttaa suoraan entsyymi-immunomäärityksen jakautumiseen ja saatavuuteen väestölle.

Diagnostisen menetelmän edut

Entsyymimmuunimäärityksellä on epäilemättä useita etuja verrattuna muihin diagnostisiin menetelmiin:

  1. Sen avulla voit jopa määrittää patogeenisten organismien vähäisen läsnäolon, mikä osoittaa testin korkean herkkyyden..
  2. Kyky havaita sairaus varhaisimmissa vaiheissa, mikä lisää huomattavasti onnistuneen parantamisen mahdollisuutta.
  3. Biologisen materiaalin ottamisen yksinkertaisuus ja mukavuus. Tällainen analyysi suoritetaan sekä yksityisissä että valtion laboratorioissa. Tarvittaessa sairaanhoitaja voi ottaa materiaalin potilaalta kotona.
  4. Analyysi vaatii hyvin pienen määrän biomateriaalia.
  5. Nopea tulos. Nykyaikaisten lääketieteellisten laitteiden avulla voit suorittaa analyysejä päivän aikana.
  6. Kyky havaita piileviä oireettomia infektiomuotoja.
  7. Opintojen saavutettavuus.
  8. Tätä menetelmää käyttävät massatutkimukset ovat tarvittaessa mahdollisia..
  9. On mahdollista seurata sairauden etenemistä ja määrätyn hoidon tehokkuutta, koska on mahdollista tehdä ELISA-analyysi monta kertaa täysin turvallista potilaalle..
  10. Analyysin vaiheiden automatisointi, joka eliminoi inhimillisen tekijän ja lisää tulosten luotettavuutta.
  11. ELISA-reagensseja säilytetään pitkään - noin vuoden.
  12. Analyysi on mahdollista ympäristön lämpötilan vaihtelulla..

Ryhmän M immunoglobuliinit

Immuunijärjestelmä tuottaa ryhmän M vasta-aineita heti vieraan antigeenin havaitsemisen jälkeen. Siksi, jos entsyymi-immunomääritys päättyi tällaisten aineiden havaitsemiseen biomateriaalissa, niin tämä osoittaa sairauden etenemisen akuutin vaiheen, primaarisen infektion. Ryhmän M immunoglobuliinit voivat olla kehossa jopa kuukauden infektion tyypistä riippuen. Sitten heidän lukumäärä pienenee täydelliseksi katoamiseksi.

Ryhmän G immunoglobuliinit

Tyypin G proteiinirakenteet näyttävät korvaavan ryhmän M. immunoglobuliinit.Nämä aine tuottaa vakaata, useimmissa tapauksissa elinikäistä immuniteettia sairaudelle. IgG: n proteiinirakenteen määrittäminen testimateriaalissa osoittaa, että keho on aiemmin tavannut taudinaiheuttajan ja että sillä on suojaava reaktio uudel- leen infektiolta..

Diagnoosin indikaatiot

Entsyymisidottua immunosorbenttimääritystä käytetään määrittämään erilaisia ​​tartuntatauteja, hormonaalisia tiloja ja tehdään allergiatestejä. Nimittäin:

  • määrittää kilpirauhashormonien taso;
  • lisääntymishormoni-paneelin indikaattorit;
  • tuumorimarkerit;
  • havaita tartuntatautien patogeenit, kuten sytomegalovirus, hepatiitti, toksoplasma, vihurirokko, tuhkarokko, tuberkuloosi, klamydia, syfilis, mykoplasma, ureplasma, candida, giardia ja jopa HIV;
  • he diagnosoivat autoimmuunisairauksia. Erityisesti entsyymi-immunomääritystä käytetään usein kilpirauhashormonien tutkimiseen: TSH, TG, T3 ja T4.

Diagnostisten tarkoitusten lisäksi entsyymimääritysmenetelmää käytetään lääketieteellisessä tutkimuksessa.

Kuinka materiaali otetaan?

Useimmissa tapauksissa laskimoverinäytteitä suositellaan analysoitavaksi. Tutkimuksen materiaalin käsittelyn ja valmistelun jälkeen suoritetaan entsyymisidottu immunosorbentti-määritys seerumille tai plasmalle.

Hormonaalisen paneelin tutkiminen vaatii erityistä huomiota, koska tässä tapauksessa on erittäin tärkeää ottaa huomioon aineen saannin ominaisuudet. Esimerkiksi useimpien hormonien diagnosointi naisen lisääntymisjärjestelmässä edellyttää laskimoveren ottamista tietyinä kuukautiskierron päivinä. Ulkoiset tekijät vaikuttavat moniin muihin hormoneihin: kausivaihtelu, vuorokaudenaika, potilaan psykologinen tila ja paljon muuta. Jos ei oteta huomioon tiettyjä tekijöitä, voit saada väärän tuloksen, mikä johtaa taudin pahenemiseen tai väärin määrättyyn hoitoon.

Joissakin, usein monimutkaisemmissa tapauksissa analyysi voi vaatia aivo-selkäydinnestettä, lasimaista huumoria tai amnioottista nestettä raskaana olevalla naisella. Näiden biologisten materiaalien keräämismenetelmiin liittyy tietty riski, niillä on vasta-aiheita ja toipumisaika. Siksi tällainen entsyymisidottu immunosorboiva määritys tulisi suorittaa vain lääkärin todistuksen perusteella ja hänen ammatillisessa valvonnassaan. Salauksen purkaminen vaatii tässä tapauksessa erityistä lääketieteellistä tietämystä ja voi viedä jonkin aikaa.

Analyysin valmistelu

Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys tulisi suorittaa noudattaen kaikkia suosituksia, koska ulkoiset tekijät vaikuttavat tutkimuksen tuloksiin. Esimerkiksi on tärkeää luovuttaa laskimoverta tyhjään mahaan aamulla (korkeintaan 11 tuntia). 2 viikkoa ennen väitettyä materiaalin saantia sinun on lopetettava lääkkeiden, etenkin hormonien, käyttö. Muutama päivä ennen tutkimusta sinun tulee pidättäytyä alkoholin ja rasvaisten ruokien käytöstä, ja sulje pois fyysinen aktiivisuus, huolet ja stressit..

Tulosten salaaminen

Entsyymiin sidotun immunosorbenttimäärityksen tulosten purkaminen vaatii erityistietoa yllä kuvattujen proteiinirakenteiden (vasta-aineiden) ominaisuuksista (IgG ja IgM). Tutkimuksen indikaattoreita analysoidaan näiden tietojen mukaisesti. Taulukossa kuvataan vaihtoehdot, jotka voidaan saada analyysin aikana:

Entsyymi-immunomääritys: kopio
Immunoglobuliinit MImmunoglobuliinit GVäitetty salauksen purku
negatiivisestinegatiivisestiKeho ei ole koskaan kokenut tätä infektiota. Sille ei ole patogeeniä tai vasta-aineita.
negatiivisestipositiivisestiKeho on kehittänyt vahvan immuniteetin tartunnalle..
positiivisestinegatiivisestiAkuutti tartunnan muoto.
positiivisestipositiivisestiTodennäköisesti primaarinfektio, mutta vaaditaan lisädiagnostiikkatestejä.

Analysoimalla esitettyä taulukkoa voidaan päätellä, että useimmissa tapauksissa tarvitaan lisätutkimuksia diagnoosin vahvistamiseksi. Entsyymisidottu immunosorbentti-analyysi yksin ei voi antaa tarkkaa vastausta. Normilla ei tässä tapauksessa ole selkeitä rajoja: Ryhmän G havaitut proteiinit osoittavat vain, että vartalo on aikaisemmin saanut tartunnan määritetyllä patogeenillä. Mutta sama tulos voi viitata akuutin vaiheen esiintymiseen - on tärkeää verrata monia tekijöitä ja indikaattoreita oikean diagnoosin tekemiseksi.

Riskitekijät

ELISA on 90% tarkka. Siitä huolimatta, on olemassa riskitekijöitä, jotka vaikuttavat diagnoosituloksen vääristymiseen: laitteiden toimintahäiriöt, virheellinen materiaalin kerääminen, varastointi ja kuljetus, muiden ulkoisten tekijöiden huomioiminen.

Diagnostiikkaa verensiirron, hemolyysin, kirurgisten toimenpiteiden, biopsian tai biologisen materiaalin puhkaisun jälkeen ei suositella - tämä voi myös vaikuttaa indikaattorien tuloksiin.

Analyysikustannukset

Diagnostisen tutkimuksen kustannuksilla on laaja valikoima ja se riippuu määritystyypistä ja määritettävästä antigeenistä, koska näiden tekijöiden perusteella lasketaan reagenssipakkausten kustannukset ja määritetään analyysin monimutkaisuus. Mutta useimmissa tapauksissa entsyymisidottu immunosorboiva määritys on saatavana monille potilaille. Sen hinta on alkaen 300 r. jopa 2000 r.

ELISA on edullinen, nopea ja erittäin tehokas menetelmä suuren sairauden luettelon diagnosoimiseen. Vain pätevä lääketieteen ammattilainen voi kuitenkin tulkita tulokset ja tehdä diagnoosin.

IFA: miten analyysi suoritetaan? Kustannus. Tulosten salaaminen

Erittäin tarkat analyysimenetelmät ovat olennainen osa nykyaikaista lääketiedettä ja erityisesti diagnostiikkaa. Aikanaan käytettävissä olevat diagnostiikkamenetelmät tekevät mahdolliseksi oikea-aikaisen tunnistamisen paitsi läsnäolon tosiasian lisäksi myös potilaan kehossa olevien loisten määrän..

Nyt potilaita kutsutaan pääsääntöisesti vain yhdestä testistä - entsyymi-immunomäärityksestä.

ELISA-verikokeen käyttö

Entsyymisidottu immunosorbentti-määritys on erittäin erikoistunut analyysityyppi, joka suoritetaan laboratoriossa. Analyysi perustuu kehon reaktioon, jota yleisesti kutsutaan ”antigeeni-vasta-aineeksi”.

Tähän indikaattoriin perustuva analyysimenetelmä antaa tarkkuuden 99%. Tämä on tarkin tällä hetkellä tunnettu menetelmä. Käytännössä melkein ei ollut tapauksia, joissa tällainen analyysi antaisi vääriä tuloksia.

Tämän menetelmän avulla voit tunnistaa:

  • huomattava määrä loisten aiheuttamia tartuntatauteja;
  • erityyppisten kasvainmarkkereiden läsnäolo;
  • lisääntymislääketieteessä - proteiinien, hormonien ja peptidien läsnäolo, joka tarvitaan potilaan hedelmällisyyden arvioimiseksi;

Testitulosten luotettavuus riippuu useista tekijöistä:

  • tietyn tyyppinen loinen;
  • kehossa olevien loisten lukumäärä;
  • kasvatusaste.

Missä tapauksissa tällaista analyysiä käytetään?

Entsyymiin sidottua immunosorbenttimääritystä käytetään laajasti monien sairauksien diagnosoinnissa. Sen tärkein arvo on, että sen avulla voit tunnistaa tarkasti oireettomat sairaudet.

Kuten tiedät, tällaisia ​​sairauksia on usein vaikea havaita varhaisessa vaiheessa, ja siksi ne alkavat hoitaa ajoissa.

Mitä sairauksia diagnosoidaan entsyymi-immunomäärityksellä:

  • onkologiset sairaudet;
  • sukupuoliteitse tarttuvat infektiot (HIV, klamydia, syfilis, ureaplasmosis, herpes ja muut sairaudet);
  • tuberkuloosi, tuhkarokko, toksoplasmoosi, hepatiitti ja niin edelleen;
  • kilpirauhashormonit;
  • sukupuolihormonit;
  • erilaiset autoimmuunisairaudet;
  • allergiset reaktiot ja tiettyjen ruokien intoleranssi.

Mitkä tekijät perustuvat ELISAan?

Tämä menetelmä auttaa tunnistamaan:

  • kehon tartunta bakteereilla ja viruksilla;
  • proteiiniemäs;
  • helmintiset tartunnat;
  • vieraat elimet.

Itse asiassa IFA-menettely koostuu kahdesta osasta:

  1. immuunivaste;
  2. entsymaattinen reaktio.

"Antigeeni-vasta-aine" -periaatteen ydin on, että taudinaiheuttaja tai vieraat elimet, ts. Antigeeni, saapuvat kehoon asteittain tartunnan lähteen mukana. Tämä prosessi aiheuttaa ns. Immuunivasteen, jonka tarkoituksena on suojata vartaloa vierailta elementeiltä..

Tällaisen suojan ilmenemismuodot riippuvat itse antigeenistä ja sen aiheuttaman taudin oireista. Tätä järjestelmää kutsuttiin "antigeenivasta-aineeksi".

Diagnoosin luotettavuuden lisäämiseksi koko entsyymisidottu immunosorboiva määritys suoritetaan vain laboratorioissa ja lääketieteellisissä keskuksissa. Erilaiset antigeenit ja vasta-aineet ovat vuorovaikutuksessa verinäytteen kanssa..

Potilaan kehossa olevien loisten tyypin ja määrän tunnistamiseksi käytetään luokkien A ja E immunoglobuliinia, joka reagoi loisten tartuntaan.

Tällaisessa analyysissä olisi yksilöitävä:

Mikä on immuunivaste ja miten antigeenin tunnistaminen määritetään?

Immuunivaste osoittaa biologiset yhteydet mikrobisolujen molekyyleissä, joiden läsnäoloa analysoidaan. Immuunivaste sellaisenaan on vain yksi kattava ELISA-ohjelman komponenteista, kun taas toinen komponentti on entsymaattinen reaktio.

Antigeenin tunnistaminen tapahtuu prosessissa, jossa immuunijärjestelmän solu (immunosyytti) on kosketuksessa vieraan solun kanssa. Antigeenien yksilölliset ominaisuudet toimivat keinona tunnistaa ystävä tai vihollinen immuunijärjestelmälle.

Mitä ovat vasta-aineet??

Itse asiassa vasta-aine:

  • Se on vain molekyyli, joka sijaitsee immunosyytin pinnalla.
  • Tätä molekyyliä käytetään vieraiden solujen tunnistamiseen..

Antigeeniä koskevan tiedon siirto tapahtuu solutasolla. Side hävitetään, jos solu on immuuni, jos ei, keho laukaisee luonnollisen puolustusreaktion.

Moderni tiede tuntee 5 vasta-aineluokkaa, joita muuten kutsutaan immunoglobuliiniksi tai proteiinirakenteiksi.

Latinalaisia ​​kirjaimia käytetään vasta-aineiden osoittamiseen: A, D, E, G ja M.

Analyysituloksissa nämä merkinnät näyttävät tältä:

Entsyymiin kytketty immunosorbentti-määritys

Ensinnäkin on tarpeen valmistaa erityisiä polystyreenitabletteja, joissa on 96 reikää. Ennen analysointia kunkin solun seinämät käsitellään absorboivalla antigeenillä..

Seerumi tiputetaan käsiteltyihin soluihin. Homologiset vasta-aineet ja antigeenit reagoivat toistensa kanssa muodostaen vahvoja sidoksia. Kiinnittämättömät rungot pestään pois. Sitten immunoglobuliinien vasta-aineet lisätään kuoppiin yhdessä erityisellä tavalla merkittyjen entsyymielementtien kanssa.

Reagenssit on merkitty vasta-aineiden tunnistamisen helpottamiseksi analysoidussa seerumissa. Kromogeeninen elementti, joka nopeuttaa reaktiota ja sävyttää kaivoja, lisätään pesun jälkeen. Värin voimakkuus verrattuna tutkittuun entsyymiin näyttää antigeenin likimääräisen prosenttimäärän verinäytteessä.

Laboratorioteknikko käyttää sitten optista nestettä:

  • mitataan vasta-aineiden pitoisuus kaivoissa;
  • Vertaa tulosta kontrollinäytteeseen, ts. Standardiin;
  • laske vasta-aineiden pitoisuus käyttämällä erityistä asteikkoa.

Helmintiainfluenssien analysointiin käytetään erityistä testausjärjestelmän versiota, jolla on omat normiindikaattorit ja poikkeamat siitä.

Analyysin valmistelu

Seeruminäytteet entsyymimmuunimääritystä varten tehdään vain laboratoriossa. He ottavat verta laskimosta, poistavat sieltä elementtejä, jotka voivat vaikuttaa analyysiprosessiin ja sen tulosten tarkkuuteen. Ota analyysi aamulla tyhjään vatsaan.

Entsyymi-immunomäärityksen tulosten dekoodaus

Vasta-aineiden laatu ja määrä osoittavat vieraiden elementtien, mukaan lukien patogeenit, läsnäolon potilaan kehossa. Nämä samat merkit osoittavat, että tulehduksellinen prosessi on alkanut kehossa.

Esimerkki ELISA-tulosten dekoodaamisesta:

Taudin vaiheIgAIgMIgG
Ensisijainen (2 viikkoa tartunnan jälkeen)+--
Ensisijainen (2,5-3 viikkoa tartunnan jälkeen)++-
Ensisijainen (3-4 viikkoa tartunnan jälkeen)+++
Kroonisen vaiheen paheneminen (2 viikkoa pahenemisen alkamisesta)+-+
Krooninen+/--+
Aikaisempi (infektio parannettu)--+
ElpyminenTitteri laski 2-4 kertaa onnistuneen hoidon jälkeen-Titteri laski 4–8 kertaa 1–1,5 kuukauden kuluttua onnistuneesta hoidosta
Negatiivinen tulos---

Tällä menetelmällä suoritettu kvantitatiivinen analyysi ei sinänsä mahdollista vielä taudin tarkkaa diagnosointia, hoitojakson määräämistä ja lääkkeiden annostelun määrittämistä.

Hyödyt ja haitat IFA

Kaikilla testausmenetelmillä, jopa edistyneimmillä ja erittäin tarkkoilla, valitettavasti etujen lisäksi on myös haittoja..

Entsyymi-immunomäärityksen edut:

  • Diagnoosimenetelmän erikoistuminen;
  • Yliherkkyys tähän menetelmään;
  • Sovelletaan uusinta tekniikkaa.

Diagnostisen menetelmän herkkyys on suuri todennäköisyys havaita haluttu, vaikka sen pitoisuus testimateriaalissa olisi erittäin matala.

Menetelmän spesifisyys tarkoittaa:

    korkea varmuusaste, ts. ei ole vaaraa väärän tuloksen saamisesta. Jos tulos on positiivinen, potilaalle taataan, että hän kärsii juuri siitä loisyypistä;

  • vaikutus "inhimillisen tekijän" tulokseen, ts. mahdollisiin laboratorion avustajan virheisiin, pienenee nollaan, mikä myös myötävaikuttaa tarkkuuden lisääntymiseen.
  • Tämän analyysimenetelmän mahdolliset haitat:

    1. Siihen kuuluu sairauden luonteen määrittäminen, toisin sanoen oikean diagnoosin "arvaaminen" intuitiivisesti tässä tapauksessa on mahdotonta;
    2. Korkeat analyysikustannukset.

    Pohjukaissuolihaavan ja suoran entsyymin immunomääritys

    ELISA-menetelmä käyttää suoraan vasta-aineiden kykyä löytää antigeeni muodostaen linkkejä leimoihin. Tätä analyysimenetelmää pidetään teollisena, tuloksen odotusaika on enintään tunti.

    Käyttöönoton jälkeen ilmestyy erityinen tarra-alusta. Vasta-aineiden taso vastaa antigeenien osuutta tutkitussa biomateriaalissa.

    Lois-tartuntojen testaamiseksi on olemassa myös pohjukaissuolen (muuten - epäsuora) menetelmä, jota käytetään laajasti ELISA-arvon korkeasta tarkkuudesta huolimatta.

    Pohjukaissuolihaava (epäsuora) entsyymisidottu immunosorboiva määritys suoritetaan kahdessa vaiheessa:

    1. Ensin verrataan leimattuja vasta-aineita haluttuihin antigeeneihin;
    2. Leimatut vasta-aineet levitetään leimaamattomille vasta-aineille, jotka on havaittu edellisessä vaiheessa..

    Siten saavutetaan antigeenien ja vasta-aineiden kaksinkertainen hallinta, mikä lisää analyysin luotettavuutta..

    Laboratoriossa suoritetulla epäsuoralla ELISA-menetelmällä antigeeni kiinnitetään reiän pinnalle, se muodostaa sidoksia vasta-aineiden leimaamattoman osan kanssa.

    Kaksitoistavuosimenetelmän edut:

    • Kaksinkertainen tutkitun biomateriaalin hallinta, mikä lisää merkittävästi tarkkuutta;
    • Paremman analyysimenetelmän tarkkuus ja spesifisyys.

    Tämä menetelmä vie kuitenkin paljon aikaa ja siihen liittyy joukko lisätoimia. Tutkimuksen tarkkuus on kuitenkin niin korkea, että se oikeuttaa tämän haitan. Tästä syystä useimmat lääkärit suosittelevat pohjukaissuolen analyysimenetelmää..

    Minne mennä, kuinka kauan odottaa ja kuinka paljon maksaa?

    Jos sinulla on kaikki tarvittavat työkalut ja tarvikkeet, voit saada tuloksen 2 päivän kuluttua toimituksesta. Jos laboratoriossa on pikaanalyysipalvelu, näyte voidaan käsitellä vain 3–5 tunnissa.

    Mistä voin ottaa IFA: n

    • osavaltion poliklinikassa;
    • yksityisillä klinikoilla.

    Entsyymisidonnaisen immunosorbenttimäärityksen hinnat riippuvat suoraan tietyn klinikan hintatasosta, sen hinta on keskimäärin vähintään 4000 ruplaa.

    Tämän tutkimuksen tuloksena saadut tiedot voivat olla hyödyllisiä panoksia lääketieteeseen, mutta potilaan tulee muistaa, että koska entsyymi-immunomäärityksen kustannukset ovat niin korkeat, olisi viisaampaa antaa tämä toimenpide luotettavaan, aikatestattuun klinikkaan..

    Valitettavasti valtion lääketieteelliset laitokset eivät aina ole varustettu uusimmalla tieteellä. Biomateriaalin korkealaatuiseen keräämiseen ja käsittelyyn piiriklinikalla ei välttämättä tarvita tarvittavia laitteita.

    Joten mikä on hyödyllistä potilaan entsyymi-immunomääritykselle:

    • avulla voit havaita helmintisen hyökkäyksen varhaisessa vaiheessa;
    • tämän seurauksena antaa sinulle mahdollisuuden aloittaa hoito ajoissa;
    • menetelmien vakauden avulla on mahdollista analysoida yhtä tarkasti lapsilla ja aikuisilla.

    Entsyymi-immunomääritys ei osoita vain laadullista, vaan myös kvantitatiivista tekijää, ts. Se ei vain osoita tosiasiaa helmintien esiintymisestä potilaan kehossa, vaan myös mahdollistaa niiden määrän arvioinnin.

    Entsyymin immunomääritys indikaattorien erittelyllä

    Immuunijärjestelmät ja entsymaattiset reaktiot

    Kuten nimestä voi päätellä, IFA-verikoe sisältää useita komponentteja, nimittäin immuuni- ja entsymaattisen reaktion.
    Immuunireaktion avulla voit yhdistää soluelementit ja patogeenit, kun taas entsymaattisen reaktion avulla voit visualisoida ja arvioida edellisen reaktion tulosta.

    Mieti kutakin reaktiota yksityiskohtaisemmin..

    Mitä immuunivasteet ovat??

    Immuuni ovat spesifisiä reaktioita, joiden avulla voit sitoutua antigeenin vasta-aineeseen ja luoda immuunikompleksin. Mitä tämä tarkoittaa? Ensinnäkin on välttämätöntä ymmärtää, että minkä tahansa solun pinta sisältää molekyylejä, jotka sisältävät tietoa solusta, joita kutsutaan antigeeneiksi ja jotka on jaettu:

    Yksittäisillä antigeeneillä on tietyistä samankaltaisuuksista huolimatta monia eroja. Ne ovat läsnä yhdessä tietyssä organismissa, eivätkä ne toistu koskaan toisissa. Lajiantigeenejä löytyy erityyppisten elävien esineiden organismeista. Joten esimerkiksi apinoilla, hevosilla tai koirilla on omat, toisin kuin mikään antigeeni. Siksi immuunijärjestelmä käyttää tämän tyyppisiä antigeenejä tunnistamaan omia ja vieraita solujaan, mikä tosiasiassa on entsyymin immunomäärityksen perusta.

    Kuinka antigeenit tunnistetaan? Kaikki on täällä tarpeeksi selvää. Yksinkertaisesti sanottuna, immuunisolu tarttuu soluun, joka on aiheuttanut sille “epäilyn”, ja vertaa sen antigeeniä kuvauksen mielessä. Jos epäilyttävän solun antigeeni vastaa sitä, immuunisolu "vapauttaa" sen ja jatkaa. Jos kuvaus on erilainen, organismin reaktio uhkaan on yksi - tuhoaminen. Lisäksi "vihollisen" tunnustaminen on tässä tapauksessa lähes 100%.

    Sandwich-tyyppinen immunomääritys-immunomääritys

    Kuva. 2. Immunomääritys "sandwich" -tyypin kaavamainen esitys. ATP on substraatin vasta-aine, ATd on detektiovasta-aine, AH on antigeeni, M on leima, joka on kovalenttisesti kytketty detektiovasta-aineeseen, P on substraatti, jolle substraatin vasta-aine adsorboituu.

    Tässä immunomääritysmuunnelmassa (kuvio 2) käytetään paria vasta-aineita, jotka ovat spesifisiä tutkitun antigeenin spatiaalisesti etäisille epitoopeille..

    I. Substraattivasta-aineiden sorptio

    96-kuoppaisen immunomäärityslevyn kuopissa 1 - 2 μg: n substraattivasta-aineet sorboidaan kuoppaa kohti 100 μl: ssa fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS). Inkubointi suoritetaan 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa ja ravistetaan vaakasuoraan tabletin ravistelijaan. Sitoutumattomien antigeenimolekyylien pesu (2-kertainen) suoritetaan fosfaattipuskuroidulla suolaliuoksella, joka sisältää 0,1% Tween-20 (PBST).

    II. Lukko

    Epäspesifisten sitoutumiskohtien estämiseksi levykuopat täytetään PBST: llä ja inkuboidaan 10 - 15 minuutin ajan huoneenlämpötilassa.

    III. Antigeenin inkubaatio

    50 μl testiliuosta tai antigeenin vakiolaimennoksia lisätään esiasorboidun vasta-ainelevyn kaivoihin. Antigeenilaimennokset tulisi valmistaa PBST: n perusteella, koska Tween-20 vähentää proteiinimolekyylien epäspesifistä sitoutumista toisiinsa ja tabletin pintaan. Sekä testiliuos että antigeenin standardilaimennokset lisätään pareittain (tai 3 toistoa) käyttämällä kahta (kolme) kaivoa kutakin proteiinilaimennusta kohden. Inkubointi suoritetaan huoneenlämpötilassa 30 minuutin ajan jatkuvasti sekoittaen. Pesu suoritetaan PBST-liuoksella 3 kertaa.

    IV. Entsyymimerkitty vasta-aineinkubaatio

    100 μl spesifisten vasta-aineiden liuosta, joka on konjugoitu entsyymimerkillä, lisätään levyn kaivoihin. Konjugoitujen vasta-aineiden optimaalinen konsentraatio on yleensä valmistajan ilmoittama (käytetään yleensä konsentraatiota 2 - 4 μg / ml). Inkubointi entsyymimerkkiä sisältävien vasta-aineiden kanssa suoritetaan 30 minuutin ajan huoneenlämpötilassa ja ravistetaan vaakatasossa olevalla ravistelijalla. Pesu suoritetaan PBST: llä 5-6 kertaa.

    V. Entsymaattisen reaktion suorittaminen, jota seuraa värillisen tuotteen esiintyminen

    100 μl substraattiliuosta lisätään kuoppiin ja inkuboidaan 10 minuutin ajan huoneenlämpötilassa jatkuvasti sekoittaen..

    VI. Pysäytä entsymaattinen reaktio

    Ennen optisen tiheyden mittaamista värireaktio pysäytetään käyttämällä 0,5 M H2NIIN4. Inkuboinnin jälkeen lisätään 50 μl 0,5 M rikkihapon liuosta kuoppiin RPD: n työliuoksen kanssa. Sen jälkeen voit heti alkaa mitata optista tiheyttä.

    VII. Absorbanssimittaus

    Värillisen tuotteen liuoksen optinen tiheys mitataan λ = 490 nm: llä tabletispektrofotometrillä.

    painettu versio

    Lisätietoja immunoglobulineista

    Kaiken kaikkiaan ihmiskeho tuottaa viittä tunnettua vasta-aineluokkaa, jotka on nimetty Ig: ksi (joka tarkoittaa immunoglobuliineja) ja jotka kuuluvat luokkiin A, M, G, E ja D. Ne kaikki ovat erittäin tärkeitä ELISA-tulosten tulkinnassa. Tietysti on paljon enemmän komplekseja, eivätkä kaikki niistä ole vielä avoinna. Mutta erilaisten sairauksien diagnosoinnissa kolme ensimmäistä vasta-ainetyyppiä ovat arvokkaimpia. ELISA-verikokeessa käytetään mahdollisimman paljon tietoa: vasta-aineiden esiintymisen hetki veressä, niiden konsentraation muutos ajasta, katoamisajasta ja spesifisen vasta-aineen tyypistä riippuen.

    Joten primaarisen, akuutin tarttuvan prosessin osallistujat ovat luokan M immunoglobuliineja, jotka osoittavat aina akuuttia vaihetta, jopa kun sairaus poistetaan kliinisesti. Tyypillinen esimerkki on akuutin virushepatiitin B tai C. anicteric muoto. Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys hepatiitille osoittaa, että henkilöllä on akuutti hepatiitti, ja oireet, kuten hypochondria, suun kuivuminen, nivelkivut ja muut epäspesifiset oireet ymmärretään helposti.

    Useiden viikkojen kuluttua nämä vasta-aineet havaitaan yhä häviävässä konsentraatiossa, mikä tuottaa luokan G immunoglobuliineja. Niitä havaitaan veressä kuukausia tai jopa vuosia, ja ne osoittavat joko toipumisen ja voivat sitten pysyä elinaikana muodostaen vahvan immuniteetin. Tämä osoittaa voimakkaan suojan taudinaiheuttajien antigeenejä vastaan. Joten tämän luokan vasta-aineet tekevät ihmisestä immuuni toistuvista pernaruton ja ruton tapauksista. Mutta joskus nämä vasta-aineet eivät häiritse antigeenien haitallisia vaikutuksia. Tässä tapauksessa voimme puhua kroonisen prosessin aktiivisuuden lisäämisestä.

    IgE: n suhteen sillä on sovelluksia erilaisten loistartuntojen ja allergisten tilojen diagnosointiin, ja IgD suorittaa aputoiminnon: entsyymisidottu immunosorbenttimääritys antaa sinun käyttää sitä kattavassa diagnoosissa keuhkoastman ja autoimmuunisairauksien hoidossa. ELISA-analyysin tulkinta on tietysti paljon monimutkaisempaa, ja immunologit voivat kertoa paljon enemmän. Mitkä ovat merkit siitä, että potilas voi mennä itsenäisesti laboratorioon suorittamaan tutkimuksia?

    Kuinka ELISA-analyysi tehdään?

    Varustetuissa laboratorioissa ja lääketieteellisissä keskuksissa treponemalimääritys entsyymiimmunomäärityksellä voidaan suorittaa useilla menetelmillä, joita kutsutaan suoriksi ja epäsuoteiksi. Näiden reaktioiden perusta on kuitenkin yksi tapa, jonka avulla voit analysoida syfilistä ELISA-menetelmällä. Tämä testi suoritetaan tietyllä tavalla..

    Laboratoriolääkärin lääkärillä on erityinen tabletti - paneeli, jossa on reikiä pyöreiden onkaloiden muodossa jopa sata. Konsentroidut syfilisantigeenit valmistetaan myös erityisesti määrityssarjoissa, jotka asetetaan ELISA-levyn kaivoihin. Sen jälkeen kun potilaan veri on otettu aamulla tyhjään vatsaan, seerumi erotetaan verestä ja asetetaan kaivoihin, joissa on antigeenejä. Antigeeni-vasta-aineen sitoutumisreaktio esiintyy kaivoissa.

    Sifilis-ELISA perustuu ensimmäisen vaiheen immuuniyhdisteiden sitoutumisreaktioon ja konjugoituu erityisen entsyymimerkinnän kanssa, jota tarvitaan reaktion laadun lukemiseen. Tässä vaiheessa lisätään entsymaattisen peroksidaasin lisäksi kromogeenisiä väriaineita materiaalin värjäämiseksi reaktion lopputuloksesta riippuen.

    Tabletin näyttämien värillisten reikien perusteella testi salataan. Eri ELISA-menetelmien sarjoihin liitetään värimaailmataulukoita, jotka määrittävät potilaan seerumin immunoglobuliinien ja vasta-aineiden määrän, määrän yksikkötilavuudessa.

    Reaktion tuloksen arvioimiseksi käytetään myös erikoislaitteistoa - spektrofotometriä fotometrian määrittämiseen ja kaivoissa olevan materiaalin tiheyden arviointiin verrattuna kontrollinäytteisiin. Tiheyden perusteella saadaan tulos, joka on selvästi vahvistettu jokaiselle syfilis-aiheuttajalle normien ja patologian rajoissa.

    yleistä tietoa

    Entsyymisidottua immunosorbenttimääritystä voidaan käyttää hormonien, immunoglobuliinien, immunologisten kompleksien sekä useiden biologisesti aktiivisten aineiden pitoisuuden määrittämiseen. Tällaisen tutkimuksen materiaalina voit lahjoittaa verta, aivo-selkäydinnestettä, lasimaisen elimen sisältöä jne..

    Entsyymisidottua immunosorbenttimääritystä on viime aikoina käytetty yhä enemmän monien etujen takia:

    • herkkyys yli 90 prosenttia;
    • säilyttämiseen tarvittavien ainesosien vakaa varastointi;
    • nopea ja helppo diagnosointi;
    • materiaalien vähimmäiskustannukset;
    • automatisoitu prosessi;
    • halpa.

    Lisäksi ELISA antaa sinun tunnistaa infektiot, mukaan lukien hepatiitti, varhaisessa vaiheessa. Siksi sitä suositellaan joskus PCR-tutkimusten sijasta sekä raskauden aikana. Se ei kuitenkaan tee ilman haittoja. Tällaisten testien tulokset puhuvat vain kehon vasteesta taudinaiheuttajalle, mutta sitä ei määritetä. Useimmissa tapauksissa suositellaan ELISA: n ja PCR: n yhdistelmää..

    IFA-testauksen avulla voit selvittää koko sarjan tulokset. Erityisesti määritetään kilpirauhashormonien normi, kasvainmarkerien läsnäolo ja joukko infektioita. Norma valitaan jokaiselle indikaattorille erikseen. Joten aikuisten kohdalla ELISA: n tulisi normaalisti näyttää TG-arvot 70 IU / ml, T4 välillä 64 - 146 nmol / L, T3 lasketaan määränä 1,8-2,8 nmol / L.

    Raskautta suunniteltaessa tällainen testaus voidaan tehdä sukupuolihormonien määrittämiseksi. Erityisesti luteinisoiva. Sen arvot vaihtelevat jakson päivästä riippuen. Erityisesti enimmäisarvo, joka voidaan havaita, on 150 ja vähintään 1 mU / L.

    Kun ELISA: ta käytetään sukupuolihormonin määrittämiseen miehillä, luku välillä 0,5 - 10 mU / L on normaali indikaattori. Jos tutkitaan kroonista gonadotropiinia, tulokset vaihtelevat sukupuolen mukaan. Erityisesti aikuisilla miehillä ja naisilla, joilla ei ole raskautta, indikaattorin tulisi olla 5 mU / ml. Jos testit tehdään raskauden aikana, tulokset voivat olla erilaisia, raskauskolmanneksesta riippuen, jopa kymmeniin tuhansiin yksiköihin.

    Mikä on klamydia

    PCR: ää, kuten ELISA: ta, käytetään laajasti nykyaikaisissa laboratorioissa sukupuolitautien diagnosoinnissa. Samaan aikaan lääkärit suosittelevat usein molempien testien suorittamista. Monet potilaat uskovat, että tämä on ylimääräinen rahanveto, mutta näillä testeillä on vakava ero, vaikka ensi silmäyksellä ne saattavat tuntua samanlaisilta. Psykologisten tutkimusmenetelmien luokitusta voidaan kuitenkin soveltaa jossain määrin.

    PCR: n ja ELISA: n tuloksia käytetään usein raskauden aikana, kun on tarpeen sulkea pois klamydiaalinfektio. Usein tällainen positiivinen infektiotulos on vastaus miesten ja naisten kysymykseen "Miksi en voi tulla raskaaksi". Hedelmättömyysriskin lisäksi raskauden aikana esiintyvä klamydia aiheuttaa vauvan tartuntariskin.

    Pääongelma tällaisen tartunnan diagnosoinnissa on oireeton kulku. Spesifiset vasta-aineet voidaan kuitenkin havaita kymmenen päivän kuluttua tartunnasta. Jos PCR-testi raskauden aikana osoittaa tällaisten patogeenien esiintymisen tai puuttumisen, ELISA kertoo sinulle, missä vaiheessa prosessi on nyt

    Tällainen tutkimus on myös tärkeä hoidon tulosten arvioimiseksi.

    Analyysin salauksen purku

    Hepatiitin tai muun patogeenin analyysi ELISA-suorituskyvyssä herättää usein kysymyksiä. Erityisesti kuinka salauksen purku suoritetaan. Tällä hetkellä tulokset osoittavat yhden viidestä immunoglobuliinista: IgA, IgM, IgG, IgD, IgE. Juuri ne erottuvat, koska muiden roolia ei ole selvitetty loppuun asti. Tutkimuksessa tärkeimmät ovat luokat A, M ja G.

    Immunoglobuliini A on ensisijaisesti vastuussa limakalvojen suojaavista toiminnoista. Heidän läsnäolonsa tulos on negatiivinen, jos tauti tunnistetaan akuutissa muodossaan heti. Sellaisten suojaavien markkereiden esiintyminen tapahtuu yleensä kaksi viikkoa taudin puhkeamisen jälkeen. Joskus positiivinen tulos saavutetaan jopa myöhemmin.

    Näiden vasta-aineiden päätehtävä on mikro-organismien havaitseminen ja tuhoaminen. Heidän lukumääränsä vähenee aina, jos tauti laantuu. Yleensä kahdeksan viikon kuluttua taudin alkamisesta positiivinen tulos puuttuu jälleen. Luokan A immunoglobuliinien havaitseminen myöhemmin voi viitata prosessiin, joka virtaa krooniseksi.

    Tärkeimmät markkerit, joiden dekoodaaminen auttaa määrittämään patologian akuutin vaiheen, ovat luokkaan M kuuluvat immunoglobuliinit. Voit havaita ne veressä viisi päivää infektion jälkeen. Niiden viivästyminen veressä on noin kuusi viikkoa, minkä jälkeen heidän katoamisensa tapahtuu nopeasti.

    Luokan G immunoglobuliinit vastaavat immuunijäämävaikutuksen muodostumisesta. Niitä alkaa havaita veressä noin kuukauden kuluttua tartunnasta. Jatkossa niiden määritelmää venytetään useita kuukausia. Usein voit tarkkailla heitä koko elämäsi. Sellaiset immunoglobuliinit muodostuvat suojareaktiona, joka eliminoi uudelleeninfektion. Esimerkiksi sellaisia ​​immunoglobuliineja muodostuu sellaisen ihmisen veressä, jolla oli lapsuudessa vesirokko ja joka sai vastaavasti immuniteetin elämän loppuun asti. Tietysti on muitakin infektioita, joiden palaaminen on mahdollista. Tässä tapauksessa analyysi havaitsee tämän ryhmän immunoglobuliinien uudelleenkasvun.

    Immunoglobuliineja E käytetään havaitsemaan loiset kehossa. Ryhmään D kuuluva immunoglobuliini sijaitsee B-lymfosyyteissä ja sitä esiintyy joissakin määrin terveillä ihmisillä. Noin kymmenen vuoden ikäisinä he saavuttavat maksimiarvonsa. Tällaisen immunoglobuliinin määrä kasvaa raskauden aikana. Lisäksi sen esiintyminen tavallista suurempana määränä voi olla merkki keuhkoastmasta, immuunipuutostilasta.

    Salauksen purkaminen

    Vasta-aineet, ne ovat myös immunoglobuliineja, jaetaan viiteen luokkaan, mutta niistä määritetään yleensä vain kolme: M, G ja A, jotka kerääntyvät kehoon eri ajanjaksoina tartunnan jälkeen.

    Immunoglobuliinit M ilmestyvät ensin, ne ovat IgM. Ne syntyvät 4-5 päivästä tartunnasta ja ovat veressä puolitoista kuukautta, jonka jälkeen ne katoavat. Jos ELISA osoittaa heidän läsnäolonsa, kyse on taudin akuutista jaksosta tai sen pahenemisesta.

    Kolmesta neljään viikkoon ilmaantuu IgG, eli luokan G immunoglobuliineja, joita voi olla läsnä useita kuukausia tai jopa vuosia peräkkäin. Jos ELISA tehtiin kahdesti kahden viikon välein ja IgG: n määrä molemmissa näytteissä kasvoi, voidaan puhua tartunnasta tai sen uudelleeninfektiosta.

    IgA, eli luokan A vasta-aineet havaitaan infektion pahenemisesta tai kuukauden kuluttua sen esiintymisestä kehossa. Suurin osa niistä kiertää limakalvoissamme ja vain viidesosa veressä. Ne katoavat vasta sen jälkeen, kun kaikki tartunta-aineet on tuhottu, ts. Vähintään kaksi viikkoa tartunnan jälkeen, enintään kahdeksan.

    Jos parantamisen jälkeen ELISA-analyysi osoittaa niiden esiintymisen, tauti on siirtynyt krooniseen vaiheeseen.

    Salauksen purkamisen yhteydessä on kiinnitettävä huomiota myös muodossa oleviin merkkeihin + ja -. Vain lääkäri voi tehdä täydellisen tuomion, mutta joitain kehon piirteitä voidaan arvioida seuraavien tietojen perusteella:

    Vain lääkäri voi tehdä täydellisen tuomion, mutta joitain kehon piirteitä voidaan arvioida seuraavien tietojen perusteella:

    • Infektioiden puutteen osoittamiseksi indikaattoreiden yhdistelmällä, kuten JgM, JgG, JgA, on kaikkialla miinus;
    • JgM ja JgA osoittavat immuniteetin esiintymisen rokotteen tai infektion jälkeen merkillä miinusmerkki ja JgG plusmerkillä (JgG (+));
    • Seuraavat indikaattorit voivat kertoa akuutin infektion esiintymisestä: JgA (- / +), JgG (- / +) ja JgM (+);
    • Kroonisten infektioiden pahenemisvaiheessa lomakkeessa on seuraava merkintä: JgM, JgG ja JgA plussilla kaikkialla;
    • Kroonisissa infektioissa havaitaan seuraava kuva: JgG (+/-), JgM (-) ja JgA (+/-);
    • JgM (-) osoittaa palautumisen.

    Usein suoritetaan myös tutkimus, kuten veren seerumin entsyymisidottu immunosorboiva määritys. Sitä tarvitaan kilpirauhashormonien tutkimiseen. Tällaisten hormonien indikaattorit, kuten tyroksiini, vapaa tyroksiini, trijodityroniini, vapaa trijodityroniini ja tyreoglobuliini, ovat tärkeitä.

    Lisäksi sellainen tutkimus on hyödyllinen tarttuvien ja autoimmuunisairauksien diagnosoinnissa..

    ELISA-verikoe

    Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys (ELISA) suoritetaan kehon suojatoimintojen kattavalle arvioinnille. Tutkimuksen aikana määritetään immuunisolujen lukumäärä ja ominaisuudet, tarvittavien vasta-aineiden läsnäolo. ELISA-verikoe suoritetaan tarttuvien, hematologisten, autoimmuunisairauksien, primaaristen ja sekundaaristen immuunipuutosten diagnosoimiseksi. Mieti, mikä on verikoe ELISA: lla ja mitkä indikaatiot ovat olemassa tässä tutkimuksessa.

    Mikä se on

    ELISA on laboratoriomenetelmä, jolla vasta-aineet tai antigeenit määritetään verinäytteessä. Tätä tutkimusta käytetään immunoglobuliinien, immunologisten kompleksien, hormonien määrän havaitsemiseen..

    Indikaatiot analyysille

    ELISA-verikokeen nimittämistä varten on olemassa seuraavat indikaatiot:

    • sukupuoliteitse tarttuvien infektioiden diagnoosi - ureaplasma, mycoplasma, klamydia, trichomonas, syfilis;
    • virustautien diagnoosi - sytomegalovirus, herpes, hepatiitti, Epstein-Barr-virus;
    • hormonitason määrittäminen;
    • syövän diagnoosi;
    • immuunikatoisuuden määrittäminen;
    • allergioiden diagnoosi;
    • preoperatiivinen kattava tutkimus ennen elinsiirtoa;
    • hoidon tehokkuuden arviointi.

    Menetelmän periaate

    Entsyymi-immunomääritysmenetelmän periaate perustuu veressä olevien spesifisten vasta-aineproteiinien - immunoglobuliinien - määrittämiseen. Ihmisen immuunijärjestelmä tuottaa immunoglobuliineja, kun antigeenejä (vieraita mikro-organismeja) pääsee kehoon. Sellaiset immuunimolekyylit sitoutuvat moniin tarttuviin patogeeneihin kehossa ja neutraloivat niitä..

    Immunoglobuliinilla on tärkeä ominaisuus - spesifisyys. Tämän vuoksi ne voivat sitoutua spesifiseen antigeeniin muodostaen antigeeni-vasta-ainekompleksin. Verikokeen ELISA: n aikana tämä kompleksi määritetään kvalitatiivisesti ja kvantitatiivisesti.

    Immunoglobuliineja on viisi. Mutta yleensä määritetään kolme luokkaa - immunoglobuliinit A, M, G. Nämä vasta-aineet kerääntyvät kehoon eri aikoina tartunnan hetkestä..

    • Luokan M immunoglobuliinit (IgM) ilmenevät veressä aivan ensimmäisenä viidentenä päivänä infektiosta. Ne ovat kehossa 5-6 viikkoa, sitten katoavat verenkiertoon. IgM-vasta-aineet osoittavat sairauden akuutin ajanjakson tai taudin pahenemisen kroonisella kulullaan.
    • Noin 3-4 viikkoa tartunnan jälkeen luokan G immunoglobuliinit (IgG) ilmaantuvat veressä. Ne voivat esiintyä ihmisen veressä useita kuukausia tai jopa vuosia. Verikokeen ELISA-tulkinnan mukaan jos kahdessa peräkkäin kahden viikon jälkeen otetussa verinäytteessä on lisääntynyt IgG-immunoglobuliinien lukumäärä, he puhuvat nykyisestä tartunnasta tai uudelleen infektiosta - uudelleeninfektiosta samalla infektiolla.
    • Luokan A immunoglobuliinit (IgA) voidaan havaita tällä testimenetelmällä 2–4 viikkoa tartunnan tai tartuntataudin pahenemisen jälkeen. Näistä vain 20% kiertää veressä, loput ovat limakalvojen salaisuudessa. IgA-vasta-aineet katoavat verenkierrosta 2–8 viikkoa tartunta-aineiden tuhoamisen jälkeen. Näiden immunoglobuliinien katoaminen tarkoittaa parannusta infektioon. Jos veressä määritetään IgA-vasta-aineiden esiintyminen sairauden päättymisen jälkeen, niin tauti on siirtynyt krooniseen vaiheeseen.

    Analyysin valmistelu

    Veren analysoimiseksi ELISA-menetelmällä käytetään useimmiten ihmisen verta. Mutta voit myös tutkia lasimaisen, aivo-selkäydinnesteen, amnioottisen nesteen sisältöä.

    Verinäyte tutkimusta varten otetaan potilaalta nielun suonesta. On suositeltavaa luovuttaa verta tyhjään vatsaan (vähintään 12 tunnin on kuluttava viimeisen aterian alkamishetkestä). On tarpeen ilmoittaa lääkärille, jos potilas käyttää lääkkeitä, koska jotkut niistä voivat muuttaa analyysin tulosta. Alkoholin ja huumeiden käyttö vaikuttaa tutkimustulosten luotettavuuteen..

    Salauksen purkaminen

    Tämän analyysin tulosmuoto osoittaa positiivisen (+) tai negatiivisen (-) tuloksen kunkin immunoglobuliiniluokan määrityksestä.

    Harkitse ELISA-verikokeen mahdollisen dekoodauksen tulkintaa.

    • IgM: n, IgG: n, IgA: n negatiivinen tulos - immuniteetin puute infektioille.
    • Negatiiviset IgM-, IgA- ja IgG-positiiviset - tartunnan jälkeinen tai rokotuksen jälkeinen immuniteetti.
    • Negatiiviset tai positiiviset IgG-, IgA- ja IgM-positiiviset - akuutti infektio.
    • IgM: n, IgG: n, IgA: n positiivinen tulos - kroonisen tartuntataudin paheneminen.
    • Negatiiviset IgM-tulokset ja negatiiviset tai positiiviset IgG-tulokset, IgA-tulokset - krooninen infektio.
    • Negatiivinen IgM-tulos ja määrittelemätön IgG, IgA - toipuminen.

    Menetelmän edut

    ELISA-verikokeella on monia etuja. Tärkeimmät voidaan erottaa toisistaan:

    • suhteellisen korkea tarkkuus (herkkyys);
    • varhaisen diagnoosin mahdollisuus;
    • kyky seurata tarttuvan prosessin dynamiikkaa;
    • korkea yhdistymisaste, joka mahdollistaa massaseulonnan;
    • analyysituloksen saamiseksi vaaditaan lyhyt aika;
    • mukavuus työssä;
    • analyysin kaikkien vaiheiden automatisointi;
    • suhteellisen alhaiset kustannukset.

    haitat

    ELISA-menetelmän haittana on, että joskus se antaa vääriä negatiivisia tai vääriä positiivisia tuloksia. Tutkimuksessa tehtyjen teknisten virheiden lisäksi väärien tulosten syy voi olla potilaan nivelreuma, kroonisten sairauksien esiintyminen (joissa tuotetaan vasta-aineita), aineenvaihduntahäiriöt ja tiettyjen lääkkeiden käyttö.

    ELISA-verikoe loisille

    Tätä menetelmää käyttämällä verikokeet selvittävät seuraavien parasiittisten prosessien esiintymisen kehossa:

    • ascariasis;
    • trikinosinoosi - analyysi suoritetaan useita kertoja, vasta-aineiden enimmäistaso määritetään 4-12 viikon kuluttua tartunnasta;
    • kystikerkoosin;
    • teniosis;
    • fascioliasis - vasta-aineet määritetään sairauden akuutissa vaiheessa;
    • opisthorchiasis - suorittaa erotusdiagnoosi taudin kroonisen ja akuutin muodon välillä;
    • Giardiaasi;
    • sisäelinten ja ihon leishmaniasis;
    • ameebatauti;
    • toksoplasmoosi.

    ELISA-verikoetta loisille käytetään antigeenien (loisten ja niiden aineenvaihduntatuotteiden) ja vasta-aineiden (immunoglobuliinien) havaitsemiseksi. Immunoglobuliinit tuotetaan kehossa antigeenien vasta-aineina. Tämän menetelmän spesifisyys loisten määrittämisessä on 90%. Tämän analyysin avulla voit määrittää loisten tyyppi, niiden lukumäärä ja vasta-aineiden määrän vuoksi prosessien dynamiikan jäljittämiseksi.

    Julkaisuja Sydämen Rytmin

    Kuinka tunnistaa ja estää ihmisen ulkoinen verenvuoto

    Ulkoisen verenvuodon tyypitVaurioituneesta aluksesta riippuen, on olemassa kolmen tyyppisiä ulkoisia verenvuotoja: valtimo-, laskimo- ja kapillaari-.

    Kilpirauhasta stimuloiva hormoni laski - mitä se tarkoittaa?

    Jos kilpirauhasta stimuloiva hormoni laskee - mitä tämä tarkoittaa keholle? Kilpirauhanen on tärkeä endokriininen elin, jossa kilpirauhashormoneja tuotetaan.